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(1)原理呈游离态的生物碱,多不溶于或难溶于水,而易溶于有机溶剂。生物碱可与酸结合生成盐,易溶于水,准确单糖组成而不溶于有机溶剂中,生物碱的盐类在碱性溶液中,生物碱又会游离出来。(2)标准品的测定取少量罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因标准品,分别加入1ml甲醇溶液,待检。(3)罂粟壳的前处理取适量罂粟壳加200ml水煮沸10rain,过滤。滤液待检。(4)单糖组成报告样品的检测取50ml汤料及50rIll加有罂粟壳的滤液,分别用10%HCI调节pH1.8—2.0,用50ml石油醚分离样品中脂肪,去掉醚层,将去除脂肪后的样液中加入20%三氯乙酸10ml沉淀蛋白质,离心分离(4500r/min)20rain后,取上清液,加5%硅钨酸5ml摇匀,使沉淀作用完全,置沸水浴中加热5min,放冷,离心分离(3000r/rain)使之沉淀完全。

①内源基因的检测用针对玉米内源的IVR基因(或Zein基因)设计的引物对玉米DNA提取液进行PCR测试,阴性对照、阳性对照和待测样品均应被扩增出226bp(或173bp)的PCR产物。如未见有该PCR产物扩增,则说明DNA提取质量有问题,或DNA提取液中有抑制PCR反应的因子存在,应重新提取DNA,直到扩增出该PCR产物。 ②单糖组成报告外源基因的检测对玉米样品DNA提取液进行外源基因的PCR测试,如果阴性对照和空白对照未出现扩增条带,阳性对照和待测样品均出现预期大小的扩增条带扩增片段长度,南通单糖组成则可初步判定待测样品中含有可疑的该外源基因,如果待测样品中未出现PCR扩增产物,则可断定待测样品中不含有该外源基因。

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